发布日期： 2024-09-20 14:01:43 来源：贝博BB平台app免费下载
质粒DNA转染技能作为一种重要的试验手法，在基因表达研讨、基因敲除研讨、基因治疗、细胞药物投递等生命科学研讨中的运用现已愈来愈遍及。那么，怎么正确的挑选出一款抱负的质粒DNA转染试剂呢？首先要考量其转染功能，这是最重要的一方面；其次还要考虑到试验的操作简洁性，最好无换液之苦而且不需求购买额定的培养基；最终，关于试验者来说，性价比也是非常重要的衡量规范。能满意以上条件的质粒DNA转染试剂，一同，无论是关于经历缺乏的“小白”仍是转染试验的“高手”；无论是易转的细胞系仍是难转的细胞系，都有不错的转染功率，这样才可以成为一款试验室常备的质粒转染试剂。
依据咱们试验室的运用经历，Lipofect 5000便是一种高功能通用型、功能好价格低的核酸转染试剂，它适用于将质粒DNA转染入哺乳动物细胞。该款试剂具有以下几个方面的特色：
转染功能是试验者最垂青的一方面，也是直接点评一款转染试剂好坏的首要规范。契合通用型特色的质粒DNA转染试剂，不只要可以对现已树立的简略细胞系进行相对有用转染，关于难转染的细胞也要有很不错的转染功率。
一般情况下，在验证一个质粒转染试剂功能时，一般会用Hela细胞做体外质控，咱们运用Lipofect 5000转染GFP质粒到Hela细胞，成果显现，转染阳性率可达90%（图1）。
别的，和lipo2000这种世界威望试剂比较，转染功率也平起平坐。如图所示，将lipo2000和Lipofect 5000分别转GFP质粒到AGS细胞（人胃腺癌细胞），24h在荧光显微下调查转染阳性率，Lipofect 5000的转染功率高达90%，可彻底比美lipo2000的转染作用。
除了以上这些较为好转的贴壁细胞，关于难以转染的RAW264.7这类悬浮细胞，Lipofect 5000也能取得较好的转染作用（如图2）。这其实是非常可贵的，因为RAW264.7细胞自身对质粒转染试剂的亲和力就比较弱，即使是威望品牌Lipo3000也很难做到对这种细胞的高效转染，这一试验成果也能充沛证明了Lipofect 5000的转染功能。
Lipofect 5000在转染试验的操作上也非常简洁。一般的质粒转染试剂在制造转染复合物时需求试验者额定购买特别培养基，如lipo2000、lipo3000需求调配Opti-MEM减血清培养基一同运用。但Lipofect 5000转染试剂中自配了专业的Trans Buffer，可彻底代替无血清培养基，减轻试验者额定花费的一同做到了与细胞亲和力更高，转染作用更安稳。
此外，因为Lipofect 5000毒性低，对细胞作用温文，转染后细胞死亡率不到10%，因而试验者在转染4-6h后不要换掉培养液，而且血清对转染作用没影响，给试验者省去了等候换液的苦恼。
从上述看来，Lipofect 5000不只能有用转染贴壁细胞，关于难以转染的悬浮胞也有很好的转染作用。在通用型DNA转染试剂中，Lipofect 5000的价格也非常友爱，价格缺乏世界威望品牌lipo2000的30%，具有极高的性价比优势，是现在许多试验室的常备质粒转染试剂。