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FECT CP 转染试剂运用说明 RN

发布日期: 2025-03-01 13:45:18 来源:新闻中心

  CP是一种丏门用于核酸分子的转染试剂,极具生物相容性,转染功率高,细胞毒性小,合适各种核酸分子(如siRNA、

  miRNA、质粒)的转染试验。该转染试剂转染时无需进行培育基替换操作,特别合适各种高通量细胞挑选试验,便利,快速,高效。

  2)取出riboFECT™CPReagent后,在漩涡振动器中充沛振动后,室温放置,使之康复到室温后运用。

  细胞至含有适量彻底培育基的24孔板培育孔中,使转染时的细胞密度能到达50~80%。

  注:1)不同细胞成长速度不同,接种细胞的数量需求根据经历而定;2)每孔接种的细胞数量尽量相同,使细胞均匀分布于培育基外表。

  注:1)请不要振动,溶液可能会呈现污浊,但不会影响转染;2)混合液可室温放置一段时刻,但不宜超越24h。

  e.将培育板置于37℃的CO2培育箱中培育24~96h(培育时刻与试验意图相关)。

  注:1)*为试验参阅用量,关于部分细胞类型要进一步优化;2)转染质粒时的转染试剂用量可优化至1μl(24孔板)。

  转染完成后24~72小时均可进行siRNA缄默沉静作用检测,最佳检测时刻与细胞类型,转染试剂,查验测验意图等相关。

  1)RNA水平的检测:mRNA是检测siRNA缄默沉静功率的最佳目标,siRNA转染后24~72h即可检测到靶基因mRNA表达显着下降,检

  2)蛋白水平的检测:蛋白是RNAi缄默沉静功率的重要目标,其查验测验手法主要为WesternBlot等。检测时刻受细胞内蛋白质表达量、半衰

  3)功用挑选:使用EdU细胞增殖,EdUTP细胞凋亡等方法来进行siRNA对细胞功用的直接挑选。