发布日期: 2024-09-26 08:48:50 来源:新闻中心
ARMS PCR是一项在PCR根底上发展起来的新办法,常用于检测DNA中各种点骤变。翌圣ARMS PCR产品具有阻滞能力强、灵敏度较高的特色,可检测低至10 ng/μL DNA中0.05%的骤变,可助力IVD企业肿瘤精准分子确诊,用药辅导等产品的快速开发。
当今肿瘤疾病人群日趋增多,检测的新办法也多种多样,有传统的病理活检,核磁共振成像,有通过肿瘤标志物进行化学发光免疫筛查,还有通过分子生物学办法的PCR检测。今日小编就来给咱们介绍分子生物学中常用来做肿瘤范畴精准分子确诊的办法--ARMS PCR。
ARMS PCR通过引物3’结尾引物规划操控等位基因特异性延伸,并结合Taqman探针的办法查验测验荧光信号值,然后判别野生型等位基因和骤变型野生基因。换言之,咱们使用ARMS PCR对野生型和骤变型等位基因检测时,可在引物规划过程中将等位基因两条上游引物中3’端核苷酸不同,两条引物分别对野生型和骤变型特异,在耐热Taq DNA聚合酶效果下,与模板不能彻底匹配的上游引物将不能彻底构成互补碱基对,然后构成错配,链延伸反响因3’,5’-磷酸二酯键构成妨碍而受阻,不能发生PCR产品,而与模板匹配的引物系统则能够扩增出相应的PCR产品,Taqman探针上相应的荧光基团可发生荧光信号被仪器检测到,终究计算出对应的△CT值。
灵敏度高:骤变型引物可检测低至10 ng/μL DNA中0.05%的骤变;
试验:模板投入量5 μL,骤变型引物扩增 10 ng/μL 野生型模板和等拷贝数骤变型质粒
图2 野生型引物扩增野生型模板和骤变型模板。依据扩增曲线发现野生型模板无起峰或野生型和骤变型Ct值差异≧6-8,到达试验预期,成功区别野生型和骤变型基因。
图4 依据扩增曲线 ng/μL 的野生型gDNA 布景下检出率可高达0.05% ,并通过商业化规范品进一步验证,阐明我司产品检出率杰出。
翌圣生物科学技术(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】成立于2014年,是一家专心于东西酶质料及抗原抗体研制与出产的高新技术型企业,致力于为生命科学范畴内的客户供给高质量的产品和优质的服务。产品包括科学研究相关根底生物学试剂,以及精准医疗范畴相关中心酶类、高通量测序类试剂盒、分子确诊质料类试剂盒、药物出产质料与检测验剂盒等多种产品,大范围的使用于科学研究、体外确诊、生物医药及疫苗开发等多个范畴,具有世界一流质量。