发布日期： 2025-04-04 01:10:01 来源：ELISA试剂盒
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中P 挑选素(P-Selectin/CD62P)含量。
本试剂盒运用双抗体夹心法测定标本中人P 挑选素(P-Selectin/CD62P)水平。用纯化的
人P 挑选素(P-Selectin/CD62P)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中顺次
构成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过完全洗刷后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催
化下转化成蓝色，并在酸的效果下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的P 挑选素
室温血液天然凝结10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。细心搜集上清。保
应依据标本的要求挑选EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20
分钟左右（2000-3000 转/分）。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成应再次离心。
用无菌管搜集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。细心搜集上清。保存过程中如有沉积
检测排泄性的成份时，用无菌管搜集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。细心搜集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度到达100 万/ml 左右。
经过重复冻融或参加安排蛋白萃取试剂，以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左
右（2000-3000 转/分）。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
切开标本后，称取分量。参加必定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷冻保存备用。标本消融
后依然坚持2-8℃的温度。参加必定量的PBS（PH7.4），或安排蛋白萃取试剂, 用手艺或匀
浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。细心搜集上清。分装后一份待检
7.标本收集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行试验。若不能马进步
8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 按捺辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
1. 规范品的稀释：本试剂盒供给原倍规范品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2. 加样：别离设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其他各步操作相同）、规范孔、
待测样品孔。在酶标包被板上规范品精确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品终究稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
5. 洗刷：当心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗刷液，静置30 秒后弃去，如此
9. 显色：每孔先参加显色剂A50μl，再参加显色剂B50μl，悄悄震动混匀，37℃避光显色
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序丈量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加停止
以规范物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出规范曲线，依据样品的
OD 值由规范曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用规范物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未
2．浓洗刷液可能会呈现结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。
3．各步加样均应运用加样器，并常常校正其精确性，以避免试验误差。一次加样时刻最好
4． 请每次测定的一起做规范曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于规范品孔榜首孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释必定倍数（n 倍）后再测定，计
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